細胞自噬(autophagy)是一種由溶酶體介導的降解過程,細胞通過形成具有雙層膜囊狀結的自噬體,包裹細胞質的一部分,并運送到溶酶體,進行降解及回收利用。正常情況下細胞內的自噬水平較低,在饑餓或應激時可迅速上調。這種降解活動有助于在生物能量需求升高期間提供營養物質(氨基酸、核苷酸、脂肪酸等)和能量。自噬的另一個功能是協助檢測和破壞細胞內病原體(病毒、細菌和寄生蟲)。自噬失調與許多疾病有關,包括癌癥、感染和退行性疾病。
細胞自噬是一個動態過程,通常分為三個階段: 在第一階段,需要被降解的細胞質組分被隔離在雙膜自噬體內,在第二階段,自噬體與溶酶體融合形成自噬溶酶體或自溶酶體,在第三階段,自噬體內容物發生降解。
美國ICT提供的自噬檢測試劑盒使研究人員能夠在體外檢測和監測活細胞自噬。試劑盒中的紅色自噬探針是一種可以穿透細胞的脂肪族分子,當插入自噬體和自溶酶體的脂膜時發出明亮的熒光。該紅色自噬探針可以通過流式細胞儀檢測。
貨號 | 名稱 | 規格 | 組分 | 優勢 |
9156 | Autophagy Assay, Red (Ex/Em=590nm/620 nm) |
50Tests | 1.?Autophagy Probe, Red 2.?10X Cellular Assay Buffer 3.?Fixative |
全細胞自噬的快速定量檢測;不需要轉染 |
9157 | 200Tests |
* 僅供科研使用,不得用于醫療.?
采用ICT的自噬檢測試劑盒(貨號9156、9157)檢測Jurkat細胞的自噬水平。用0.5μM雷帕霉素(橙色)、10μM氯喹(藍色)或同時用0.5μM雷帕霉素和10μM氯喹(紅色)處理細胞18小時。自噬探針Red染色60 min后洗滌細胞,采用流式細胞儀(配備綠/黃激光(561 nm激發)和610/20發射型濾光片)進行分析。直方圖的疊加顯示在右邊。顯示中位數熒光信號、%陰性和%陽性細胞的表如上所示。雷帕霉素或氯喹處理后與未處理的對照組相比熒光信號增強。雷帕霉素和氯喹聯合處理后,熒光信號進一步增強。
【文章鑒賞】
Evaluation of the Anticancer Activities of Novel Transition Metal Complexes with Berenil and Nitroimidazole. Molecules. 2020 Jun 21;25(12):2860
美國ICT除了可提供全面的細胞活性檢測相關試劑,包括凋亡、 caspase、 自噬、細胞毒性、壞死等相關檢測,還可以同時提供高質量高靈敏度的 ELISA以及相關試劑,包括包被液、封閉液、沖洗液、底物、終止液、板子等等。
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來源:ImmunoChemistry流式細胞儀輕松監測活細胞自噬方案
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